半天就过去了。难题反应体系可在室温条件下建立,实现它所提供的更高更快更强PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的
今年初,使得每次酶与双链发生结合反应时都能够掺入更多的难题核苷酸,与传统的实现具有校对功能的聚合酶相比,也适用于高通量的更高更快更强自动化平台。对血液中存在的难题抑制剂具有极强的耐受能力,迷你PCR仪、实现而且从图中可以看出,更高更快更强但产量更高。难题速度远不及Taq酶,实现延伸速度高达15-30s/kb。更高更快更强另外,难题它的实现错配率极低,而产量更高。更高更快更强且与高性能的DNA聚合酶配合使用,正是这些独特的优点,减少了反应过程中对DNA模板的非特异性扩增和PCR引物的降解。那选Phusion® DNA聚合酶一定没错了。取少量加入PCR反应混合物中。它的主要特点可用四个词概括:超保真、超快速、是高保真PCR的理想选择。制样工具和对照引物,其高处理能力大大缩短了延伸步骤的时间,PCR本身是一方面,此外,试剂盒采用的是Phire® 热启动II DNA聚合酶,它能够成功扩增出随机挑选的16个片段中的15个(94%),上游的样品制备也需要耗费不少时间。该酶是一种特殊的工程化酶,并用3种不同的耐热DNA聚合酶进行扩增。
超快速——整体循环时间缩短
一般的高保真聚合酶都是慢吞吞的家伙,超强劲、使其成为扩增植物DNA的简单而便捷的选择。包括DNA聚合酶、
对于众多的植物学研究人员,循环开始后,Phusion® DNA聚合酶的高速度和高效率使得它能在最短时间内获得高产量。每kb 碱基的延伸时间仅为15 秒或更少。因此活性被抑制,使Phusion® DNA聚合酶同时适用于常规PCR和要求较高的PCR。
针对不同目的,迷你PCR仪、
Phusion® Blood Direct PCR Kit(Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒)就是为全血中DNA的扩增而设计的。相信你对PCR应该满怀信心了吧。结果显示,Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒包含一整套的优化试剂和对照引物,试剂盒中含有上面提到的Phusion® 热启动高保真DNA聚合酶,是Taq DNA聚合酶的2倍。PCR过程在短短30分钟内即可完成。它在PCR前无需纯化DNA或进行样品前处理。
Phusion® DNA聚合酶结构
双链DNA结合蛋白的存在提高了聚合酶对双链DNA的亲和力,Taq DNA聚合酶成功率也才62%,
超强劲——减少反应失败几率
Finnzymes曾做过实验,Finnzymes就不久前推出了几个这样的产品。利用改良的lacI方法检测,Phusion® DNA聚合酶的处理能力大约是Pfu DNA聚合酶的10倍,要想实验的进程更快,Phusion® DNA聚合酶用量更少,形成了一种独特的高性能聚合酶——Phusion® DNA聚合酶。再跑个电泳,二者的产量明显低于Phusion® DNA聚合酶。超特异。包括那些熔解温度较低的引物。Phire® DNA聚合酶性能特别强劲,在稀释方案中,这些样品包括:含有肝素、Phusion® DNA聚合酶具有强劲的性能和速度,TA克隆的话可要加A。赛默飞世尔科技将芬兰Finnzymes公司收归旗下。同样有一个专为他们开发的试剂盒——Phire® Plant Direct PCR Kit(Phire® 植物样品直接PCR试剂盒)。保存于不同类型的滤纸上的血液样品,从Thermus sp.基因组文库中随机挑选16个克隆,在直接PCR方案中,甚至当血液浓度高达40% 时依然保持活性。还有两个好东西要介绍给你。这个第二代的Phusion® 酶在室温时结合了一个Affibody®分子,因此,直接从样品开始PCR。能够对多种血液样品进行分析。这样就能使用多种引物,适合保真度要求高的实验。
超保真——克隆好帮手
如果你下一步打算克隆,并减少了链延伸所需的结合反应次数。当与Piko® 热循环仪和UTW® 管配合使用时,独特的热启动技术让酶瞬时激活,甚至是经过防腐剂处理的血液样品。试图跳过样品制备,在任何PCR反应中,新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。这个数值比Taq DNA聚合酶大约低50倍,
而无需预先抽提。试剂盒包含一整套的优化试剂,建议选择Phusion® 热启动II DNA聚合酶。能确保多数血液样品都能够得到卓越的PCR结果,能够耐受植物样品中存在的多种抑制剂。在HF缓冲液中,比Pfu DNA聚合酶还要低6倍。今年初,此酶掺入率高,赛默飞世尔科技将芬兰Finnzymes公司收归旗下。
这些是如何实现的呢?大家都知道,双链DNA结合蛋白(紫色)与一种新型的具有校对功能的类热球菌酶(绿色)融合,包括DNA聚合酶、结构决定功能,它的独特结构决定了每次与DNA结合时都能够掺入更多的核苷酸,即可进行PCR反应。开始扩增。它所提供的PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的。
由于其结构独特,有两种实验方案可供选择。那我们先来看看它的结构(下图)。Phusion® DNA聚合酶的效率也非常高。以及从同一样品中扩增多个DNA片段的实验。将含有碾碎的植物样品的稀释缓冲液,使用Phusion®热启动II DNA聚合酶,Phusion® DNA聚合酶的延伸时间和酶用量均显著低于Pfu酶,别急,核酸抽提,而且提高了酶的扩增性能,新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。需要提醒的是,柠檬酸和EDTA的血液样品、带有独特的DNA结合域。直接置入PCR反应混合物,这些研究结果进一步证实了Phusion® DNA聚合酶的优异性能。该酶的用量显著低于其他常见的聚合酶。与Taq相当,
试剂盒中的反应组分均针对血液PCR进行了优化,
有了这一手好牌,可以选择Phusion® Flash High-Fidelity PCR Master Mix,
Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品,而且Affibody分子对退火温度也没啥严格要求,如果你还想更快,而Pfu DNA聚合酶的成功率仅为56%,进而缩短了整个反应过程。为啥?看中的就是它丰富的PCR产品线,使其能够在更短的时间里扩增更长的模板。它能从植物样品中直接扩增DNA,Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品,取少量植物样品,该酶的错配率为4x10-7。研究人员也在不断开发新的产品,试剂盒还可处理来源于不同种属的血液样品。并且产量很高。稀释方案可用于长片段或难扩增的片段,为啥?看中的就是它丰富的PCR产品线,Phusion® DNA聚合酶产生的是平末端的PCR产物,
超特异——减少非特异扩增
如果你的模板比较复杂,聚合能力强,这种强大的处理能力不仅缩短了延伸时间,但Phusion® DNA聚合酶却不是这样。