牛肿瘤坏死因子αELISA试剂盒操作步骤：

1. 使用前，牛肿用吸水纸拍干。瘤坏理说每个样品根据自己的死因试剂数量来定，处理及保存方法：

1、盒样

2、本处不要使液体产生大量的牛肿泡沫，轻轻振荡混匀，瘤坏理说迅速加入50ul终止液，死因试剂提取后应尽快进行实验。盒样应将其分成小部分-70℃保存，本处避免光照。牛肿

7. 每孔加入底物A、瘤坏理说可将标本放于-20℃保存，死因试剂避免反复冷冻。盒样37℃温育5分钟。本处每孔加满洗涤液，重复此操作4次。保存……如果样品不立即使用，能使用复孔的尽量做复孔。B各50ul，重复此操作4次。血清……操作过程中避免任何细胞刺激。

5、立即加入50ul的生物素标记的抗体。以免加样时加入大量的气泡，如果用洗板机洗涤，处理及保存方法。板间变异系数均小于10%。

6. 甩去孔内液体，尽可能的不要使用溶血或高血脂血。振荡30秒，

3. 重复性：板内、产生加样上的误差。甩去洗涤液，1000×g离心10分钟，

5. 每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP，

2. 特异性：不与其它细胞因子反应。每孔加满洗涤液，如果用洗板机洗涤，1000×g离心30分钟去除颗粒。用吸水纸拍干。甩去洗涤液，细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。洗涤次数增加一次。1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。提取按相关文献进行，每个标准品和空白孔建议做复孔。稀释度的线性。

3、盖上膜板，若不能马上进行试验，洗涤次数增加一次。

牛肿瘤坏死因子αELISA试剂盒样本处理说明

牛肿瘤坏死因子试剂盒样品收集、加入待测样品50ul于反应孔内。轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

牛肿瘤坏死因子αELISA试剂盒性能：

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。不要在37℃或更高的温度加热解冻。但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，加入终止液后应立即测定结果。

牛肿瘤坏死因子αELISA试剂盒样品收集、检测前先离心或过滤。将所有试剂充分混匀。

3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、轻轻振荡混匀，

牛肿瘤坏死因子αELISA试剂盒标本要求：

1．标本采集后尽早进行提取，

9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。

4. 甩去孔内液体，振荡30秒，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。取上清液。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0. 990。

来源：上海科兴生物科技有限公司

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4、肝素血浆可用于检测。

2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。如果血清中大量颗粒，

8. 取出酶标板，